pbs缓冲液配制方法PBS缓冲液配制

PBS缓冲液是一种常用的生命科学实验缓冲液 , 能够维持生物分子的稳定性 。以1L为例 , 配制 *** 如下:将8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4加入到1L蒸馏水中 , 调整pH值至7.4 , 用蒸馏水将溶液补至1L , 即可得到配制好的PBS缓冲液 。

pbs缓冲液配制方法PBS缓冲液配制

文章插图
一:pbs缓冲液配制 ***PBS溶液配置 *** :
采用去离子水、KH?PO?和Na?HPO?·2H?O配制PBS溶液 , 按以下步骤进行:
1、配制1/15mol/L KH?PO? , 即每升水中溶解9.078克KH?PO? 。
2、配制1/15mol/LNa?HPO?·2H?O , 即每升水中溶解11.876克Na?HPO?·2H?O 。
3、将18.2%(体积分数)KH?PO?溶液和81.8%Na?HPO?·2H?O混合 。
磷酸缓冲盐溶液作用
【pbs缓冲液配制方法PBS缓冲液配制】1、因为PBS缓冲液具有可调整的适宜pH缓冲作用和盐平衡的作用 。不使用蒸馏水的原因在于水会破坏生物蛋白的结构和生物特性 。不使用生理盐水的原因在于它不能够调整PH值 。所以 , 对生物细胞进行清洗是PBS缓冲液 。
2、PBS缓冲液的PH值是细胞的PH值范围 , 而且在酸碱微量的 *** 下 , PH值一般也没有任何的变化 。培养基的PH值时很容易变化的 , 对于细胞具有j大的损伤 , 但是PBS缓冲液可以保持细胞能在适合的PH值范围之内健康的生活活 。
二:PBS缓冲液配制很简单 , 先看PBS粉末包装袋上写的能配多少体积缓冲液 , 假设写的是2 L , 那么将整包粉末倒入干净的烧杯中 , 加1.5 L蒸馏水 , 溶解粉末(充分搅拌溶解) , 用容量瓶定容至2 L , 即可 。
三:pbs缓冲液配制的注意事项一、细胞培养所需的培养液
在细胞的研究和利用过程中 , 最主要的是要为细胞提供最适的生长条件 , 保持细胞培养开始时的群体状态 。这就要求培养条件始终如一 , 近乎呆板地坚守细节和常规 , 而且细胞培养 , 试剂昂贵 , 费时、费力 , 不是随随便便就可以进行的 。
细胞只有在最适生长条件下 , 才会保持正常的核型及功能 。如果培养条件上打折扣 , 就意味着会出现带有染色体重排或突变变异株细胞 。某些营养成分或生长因子用量不足或细胞高密度培养时间过长 , 都不是最适生长条件 。
二、平衡盐溶液
平衡盐溶液具有维持渗透压、调节酸碱平衡的作用 , 同时可以供给细胞生存所需的能量和无机离子成分 。最常用于洗涤组织或细胞、配制培养用液的基础溶液是Hanks 溶液和磷酸缓冲盐溶液(简称PBS)。
三、血清
血清中含有丰富的营养成分 , 包括多种生长因子及许多未知成分 。动物细胞的生长都依赖血清 。血清的种类很多 , 包括胎牛血清、小牛血清、马血清、兔血清、人血清等 。
选择一批最适于细胞的血清是很重要的 , 而且如有可能的话 , 应要求购买
四、抗生素
一般细胞培养时 , 抗生素不是必需添加成分 。但一些特殊情况下培养液内需加入适量的抗生素 ,  如怀疑有污染、原代培养时、新手操作不够熟练 。常用的抗生素有青霉素、链霉素、卡那霉素和庆大霉素 。青霉素常用剂量为100U/ml , 链霉素常用剂量为100μg/ml 。常配制成100 倍或200 倍 ,  分装为小包装 ,  于-20℃条件下保存 。一次用一个小包装 ,  避免反复冻融。